寡肽冻干粉的冻干保护剂筛选及其生物活性保持研究

以寡肽 - 1（表皮生长因子，EGF）为模型，通过正交试验优化冻干工艺：保护剂组合为 5% 海藻糖 + 2% 甘露醇 + 0.1% 聚山梨酯 80，预冻温度 - 40℃（2h），升华阶段压力 10Pa、温度 - 20℃，解析阶段温度 30℃（4h）。该条件下冻干粉含水率≤3%，复溶时间 < 30s，EGF 回收率达 92%。差示扫描量热（DSC）显示，保护剂使 EGF 的玻璃化转变温度（Tg）从 - 18℃提升至 + 8℃，4℃储存 6 个月后活性损失 < 10%（MTT 法检测细胞增殖率）。扫描电镜观察表明，优化后的冻干粉呈多孔海绵状结构（孔径 5-10μm），利于复溶时溶剂快速渗透。安全性评价显示，内毒素含量 < 0.5EU/mg（鲎试剂法），宿主蛋白残留 < 0.01%（ELISA），符合医药级原料标准。细胞实验进一步证实，复溶后的寡肽溶液可使 HaCaT 细胞迁移速度提升 60%，显著促进表皮修复（划痕愈合实验）。