多肽冻干粉的固相合成工艺优化与杂质控制

以 Fmoc 固相合成法制备十肽 KTTKS，优化反应条件：偶联试剂 HBTU/HOBt（3eq）、反应时间 45min、脱保护剂 20% 哌啶 / DMF，使粗肽纯度从 65% 提升至 82%。采用反相制备色谱（C18 柱，梯度洗脱 0-80% 乙腈）纯化，获得纯度≥98% 的目标产物（HPLC 检测），主要杂质（缺失肽、氧化肽）控制在 0.5% 以下。冻干过程中添加 1% 甘露醇作为晶型稳定剂，使冻干粉外观呈疏松多孔状，复溶后肽含量回收率达 99%，内毒素水平 < 0.5EU/mg，满足医药级冻干粉质量标准。