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纤维连接蛋白原料的获取是其应用的基础,目前主要来源于血浆和细胞培养,不同的来源对应着各具特色的提取技术,为纤维连接蛋白的生产提供保障 。从血浆中提取纤维连接蛋白是较为传统的方法 。人体血浆中含有丰富的纤维连接蛋白,通过冷乙醇分级分离、亲和层析等技术,可从血浆中分离纯化纤维连接蛋白 。冷乙醇分级分离利用不同蛋白质在乙醇溶液中溶解度的差异,初步分离血浆蛋白;亲和层析则利用纤维连接蛋白与特定配体的特异性结合,进一步纯化纤维连接蛋白 。这种方法提取的纤维连接蛋白具有天然的结构和功能,但存在血浆来源有限、可能存在病毒污染风险等问题 。
随着生物技术的发展,通过细胞培养生产纤维连接蛋白成为新的趋势 。科学家利用基因工程技术,将编码纤维连接蛋白的基因导入哺乳动物细胞、昆虫细胞或微生物细胞中,使其表达并分泌纤维连接蛋白 。哺乳动物细胞,如中国仓鼠卵巢细胞(CHO 细胞),能够对纤维连接蛋白进行正确的折叠和糖基化修饰,生产出与天然结构相似的纤维连接蛋白 。通过优化细胞培养条件,如培养基成分、培养温度、pH 值等,可提高纤维连接蛋白的产量和质量 。与血浆提取法相比,细胞培养法具有来源稳定、可大规模生产、安全性高等优点,逐渐成为纤维连接蛋白原料生产的重要方向 。